OTRA PRUEBA MOLECULAR ( DIFERENTE A LA PCR) EN LA DIABETES MELLITUS

Otra prueba molecular(diferente a la PCR)  en la Diabetes Mellitus

Western blot para encontrar nuevas vías de transducción en la captación de glucosa

Western blot, inmunoblot o electrotransferencia, es una técnica analítica usada en biología celular y molecular para identificar proteínas específicas en una mezcla compleja de proteínas, tal como la que se presenta en extractos celulares o de tejidos. La técnica utiliza tres etapas para lograr esto: separación por tamaño, transferencia a un soporte sólido y, finalmente, visualización mediante la marcación de proteínas con el uso de anticuerpos primarios o secundarios apropiados. (1)


 Las proteínas se resolvieron en geles en gradiente de poliacrilamida entre 5 al 12% p/v con SDS.Las proteínas se transfirieron a membranas de nitrocelulosa de 0,2 μm a voltaje  constante.  Posteriormente, las membranas se bloquearon con leche descremada al 3% p/v en TBS-T por 1 h y se incubaron con el primer anticuerpo. Luego de lavar las membranas, se
incuban con un segundo anticuerpo. La unión específica se detectó mediante quimioluminiscencia (ECL), utilizando película BioMax MR.(2)

BIBLIOGRAFÍA:

1. Milton Laskiba,Manejo de la técnica Western Blot. Determinaciones relacionadas con obesidad y diabetes.  Trabajo Fin de Master. (Online) 2015  Disponible en: https://addi.ehu.es/handle/10810/15183

2. Carolina Carrillo, NUEVAS VIAS DE TRANSDUCCIÓN EN LA CAPTACIÓN DE GLUCOSA DEPENDIENTE DE INSULINA EN CULTIVOS DE CARDIOMIOCITOS DE RATA ADULTA. MEMORIA PARA OPTAR AL TÍTULO DE QUÍMICO FARMACÉUTICO. (Online) 2010. Disponible en:  http://repositorio.uchile.cl/bitstream/handle/2250/115438/carrillo_cc.pdf?sequence=1